· полиакриламидгель нь акриламидын мономер, полимержих эхлэлийн материал, катализатор, давс, буферийн холимгийг хамтад нь хийнэ.
· акриламидболон BIS (N, N '- метилен давхар акриламид) нь мономер хэлбэрийн гель матриц юм.
· аммонийн персульфат наалдамхай полимержих процессыг эхлүүлэх.Цавуугийн найрлагад усанд бэлтгэсэн аммонийн персульфатын 10% уусмал шаардлагатай.Ихэнх мэдээлэл нь идэвхтэй ашиглах шаардлагатай байгааг харуулж байна.Гэсэн хэдий ч 10% -ийн уусмалыг 4℃ температурт хэдэн долоо хоногийн турш үйл ажиллагаагаа мэдэгдэхүйц алдагдуулахгүйгээр байрлуулж болно.10 мл хүртэл дүүргэж, цавуу нэгтгэж чадахгүй бол хаяна.
Зөвлөмж: -ийн хувьакриламиддараалалд цавуу, уургийн цавуу нь ижил биш юм.Урьдчилан бэлтгэсэн акриламид: BIS уусмалыг хэрэглэж байгаа бол зөв савыг авах хэрэгтэй.
· TEMED (N, N, N ', N '- тетраметил этилендиамин) нь катализатор, бор саванд, хөргөгчинд хийнэ.Цавууг цутгахын өмнөхөн нэмнэ.
· Электрофорез хийхэд ашигласан шилийг полиакриламид электрофорез хийхээс өмнө болон дараа нь угаах хэрэгтэй.Электрофорезийн дараа зөөлөн сойз, даавуугаар халуун савантай усаар угааж, нэрмэл усаар зайлж, хатаана.
· Хөндий полимер нь чийг, тоос шороо үүсгэж болно.Электрофорезын өмнө шилэн хавтанг шилэн цэвэрлэгчээр цэвэрлэж, зөөлөн сойзоор арчина.Нэрмэл усаар угааж, цаасан алчуураар сайтар хатаана.Цаасаар арчихын өмнө 70%-ийн этилийн спиртээр зайлах нь цэвэрлэж, хатаалтыг хурдасгахад тусалдаг.Акриламидын дээжийг дараалан нэмнэ: BIS, ус, буфер уусмал, аммонийн персульфат, TEMED.Сайн сэгсэрч, нэн даруй хийнэ.
Полимержихээс өмнө полиакриламидыг хийгүй болгох шаардлагагүй.(Хүчилтөрөгч нь полимержилтийг дарангуйлдаг тул акриламидыг вакуумд хийж бөмбөлгийг арилгадаг байсан.)
Хэвтээ цавуу цэгийн дээжийн зөвлөмжүүд.
· Доод талын хайрцагт хар цаас хийж, илүү тод харахын тулд дээжийн нүх гарга.
· Цавуугийн саваар дүүргэсэн буфер, коллоид дээр л.
· Хэрэв ирмэг нь гэрэлтэй бол гэрлийг асаагаад коллоид гэрэл тусга.Сорьцыг соруур руу зурна.
· автомат соруулах төхөөрөмж ашиглан .
· Дээж дээрх ихэнх цэгүүдэд 10-200 м 1 шингэн шилжих цэгийг ашиглаж болно.Маш жижиг сорьцын нүхний хувьд (10μ1-ээс бага) цавууны дараалалд хэрэглэдэг урт пипеткийн толгой нь илүү тохиромжтой.
· сорьцонд дөнгөж дүрж, аажмаар хөдөлж буй шингэнээр амьсгалах.Дээж нь глицеринтэй наалдамхай мэт харагдах бөгөөд хурдан шахах нь пипеткийн толгой руу агаарын бөмбөлөг үүсгэж болно.
· Соруулалтын толгойг амьсгалсны дараа сорьцууд нь хоолойн ирмэг дээр шингэний толгойг зөөлөн хөдөлгөх эсвэл арчих цаас нь дуслын гадна талд шингэний толгойг сорох болно.Дээжийг сорохоос болгоомжил.
Дээжийг дээжийн нүхэнд хийнэ
· Бага зэрэг даралттай байлгахын тулд соруулах төхөөрөмж, дээжийг халих шингэний толгойг бага зэрэг хөдөлгөх.
· Буферт суулгасан соруурын толгой нь спот нүхнээс арай өндөр, эерэг даралтыг хадгална.Пипеткийн үзүүрийг жижиг нүхэнд хийж болно.
· дээжийг аажмаар, тогтвортой гаргаж .Пипеткийн үзүүрийг цэгийн дээжний нүхний дээгүүр байрлуулсан бөгөөд дээж нь нүхэнд живнэ.Дээжийг түлхэхийн оронд дээжийн нүхийг дүүргэхийн тулд живүүлээрэй.
· Шингэн толгойтой дээжийн сүүлчийн дусал дусмагц шингэн хоёр дахь хөл рүү шилжиж, шингэнийг аажмаар дээшлүүлж, буферээс гарна.
Босоо цавууны дээжийг хэрхэн яаж хийх вэ?
· Хоёр ширхэг шилний хооронд үүссэн босоо цавууны цэгийн дээжийн нүхнүүд.Маш нимгэн цавуугаар пипеткийн толгойг хоёр шилэн хавтангийн хооронд ч оруулах боломжгүй.Глицериныг ажиглаарай!Пипеткийн толгойг дээжийн нүхний дээгүүр тавихад дээж нь нүхэнд живнэ.
· Дээж авахын өмнө полипропилен ацил гель дээжийн нүхний босоо цэгийг сайтар зайлж угаана.Полимержүүлээгүй акриламид болон дээжийн нүхний ёроолд гарч болзошгүй усыг зайлж угаана.Ус нь дээжийн нүхийг мэдэгдэхүйц багасгаж чадна.25 мл эсвэл 50 мл тариур, 18 хэмжээтэй зүү хэрэглэнэ.Электрофорезын буферт хийнэ, дээжийн нүхийг сайтар угаана.
· Дээжний нүхийг харахад хэцүү байж болох ч бусад нь хялбар байдаг.Хэрэв илүүдэл нүх байгаа бол дээжийн буферийг бромфенолын хөхөөр шалгаж болно.
Шуудангийн цаг: 2023-03-31